掃描電鏡是用聚焦電子束在試樣表面逐點掃描成像。試樣為塊狀或粉末顆 粒,成像信號可以是二次電子、背散射電子或吸收電子。其中二次電子是主要的成像信號。由電子槍發(fā)射的能量為 5 ~ 35keV 的電子,以其交 叉斑作為電子源,經(jīng)二級聚光鏡及物鏡的縮小形成具有一定能量、一定束流強度 和束斑直徑的微細電子束,在掃描線圈驅(qū)動下,于試樣表面按一定時間、空間順序作柵網(wǎng)式掃描。聚焦電子束與試樣相互作用,產(chǎn)生二次電子發(fā)射(以及其它物 理信號),二次電子發(fā)射量隨試樣表面形貌而變化。二次電子信號被探測器收集 轉換成電訊號,經(jīng)視頻放大后輸入到顯像管柵極,調(diào)制與入射電子束同步掃描的 顯像管亮度,得到反映試樣表面形貌的二次電子像。下面小編為您介紹如何對掃描電鏡的樣品處理,共有四點大家牢記。
1、主要包括表面清洗、固定、沖洗和脫水處理,基本類似于透射電鏡樣品的處理,但有其特殊性。
2、樣品尺寸略大于TEM樣品,8 ~ 10mm2,高約5mm。
3、常見的固定和脫水方法有戊二醛-四氧化二砷雙重固定或戊二醛單一固定。
4、組織電導技術: 該技術的目的是提高樣品的電導率,克服生物材料的電荷效應,提高樣品表面的二次電子發(fā)射率。
干燥好的樣品若暫時不用,可放在干燥器或真空中保存,樣品粘臺后要放入透射電鏡底片抽氣室預抽氣數(shù)小時再放入掃描電鏡觀察。加速電壓不宜用得過高,滿足要求即可,能用低電壓就不用高電壓。放大倍數(shù)不超過一萬倍時一般15-20 KV 就可以了。同時,應保持工作電壓與工作水平距離的相對穩(wěn)定,如無特殊需要,不要經(jīng)常換電壓與工作人員的距離。因為頻繁改掃描電鏡工作環(huán)境參數(shù)不利于掃描電鏡穩(wěn)定的工作。